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    课题实施

    时间:2011-12-07 21:03 来源:中华急救网 作者:网络 点击:

    课题实施

    一、预实验

    1、定义:指在正式实验前所进行的小规模实验。

    2、目的:检查各项准备工作是否完善;确定实验操作方法是否正确可行;获得某些基础数据,确定合适的样本数和必要的统计学数据,以确保后续正式实验的顺利进行;摸索最佳实验条件;初步检验假说。

    二、正式实验

    通常在预实验后正式实验开始前还须进行决定性实验,即在预实验所提供数据基础上,进行综合性、整体性、关键性的实验。决定性实验的主要作用是通过进行某些简单的实验来判断研究假说的成立与否。若假说正确,便可开始正式实验,否则须重新考虑实验方案的可行性及立项依据的合理性。

    注意事项:

    1、根据预实验结果,选定实验条件,整个实验过程严格控制实验条件,一般不能随便改变,以避免实验结果的不可比。

    2、实验方法的标准化(包括步骤、试剂配制、浓度稀释、仪器型号和参数等)。

    3、设计各种必要的对照。

    4、做好标签工作(老鼠、组织、切片、试管等)。

    5、必须满足统计学分析的足够样本数。

    三、实验操作规程的规范化

    1、标准物的选择

    建立标准实验体系,选择标准品是非常重要的因素之一。一般情况下,国家质量监控部门提供的相关样品可作为实验标准品,并在预实验中利用标准品确定各种实验条件(包括最佳剂量、最佳时间和判断标准等)。然后,以此数据作为测试样品的标准定量或定性参数。某些实验项目可能尚无国家标准,需自备相对标准品,以此确定各种实验条件,并在其后的测试中始终采用相同标准,这也是一种标准化的方法。另外,若确实缺乏标准物作为系统标准,可设定严格的阳性对照和阴性对照。

    2、操作程序的控制

    实验操作流程涉及多个步骤,且每一步骤有不同间隔时间或操作技巧,或可能伴随出现某些中间实验现象。因此,若不进行严格规范,最易出现的问题即随机改动某个操作程序,从而增大实验误差,故随机性是造成实验误差的最常见原因

    控制随机性的办法即将实验流程标准化,并进行严格控制。按照标准操作流程,实验操作人员仅进行机械性操作,无需任何想象、设计和预测,故要求在操作之间制定严密的操作流程和设计方案。控制随机性操作的关键是改变操作者观念,培训其标准化观念和素质,避免随意改动。但在实验研究中,实验方法的优化或修改是经常性的科研活动,也是为科研服务的一种方式,故应在明确实验目的的前提下,协调标准化和灵活性之间的关系

    标准化方法是在对实验方法进行优化、调整甚至修改后所制定,而优化实验方法是预实验中需要解决的问题。一旦进入正式实验阶段,实验方法的操作流程、判断标准及其他条件已确定,一般无需(也不应)进一步优化研究;除非在实验中出现意外现象提示需要进一步优化,因此,灵活性和标准化是相辅相成的。一旦必须在实验中进行修改,则应详细记录,供日后分析结果时参考,如实验中因突然断电、试剂短缺或出现其他不可抗拒的情况,导致实验规程被迫变动,但不致影响实验进程。

    3、试剂和仪器选择

    标准化实验操作的另一关键因素即试剂的质量。不同厂商所提供的相同试剂均可能存在质量差异,建立标准实验方法时,须事先对不同厂商的试剂进行实验流程的优化,确定适合本实验体系的最佳试剂批号,其后的实验过程中应采用同一厂商相同批号或相同规格的试剂,以基本保证不同批次实验的差异并非由试剂所致。

    在实验材料来源的规范化受到重视的前提下,配制试剂所用水的质量有时易被忽略。实际上,水的差异很大,如去离子水、蒸馏水或自来水,摸索实验条件时宜采用不同的水配制试剂,有时可能获得意料之外的效果。仪器规格、型号也可能影响实验,规范操作流程时应根据条件使其具体化。

    总之,标准化的关键因素是人,只有提高操作者的标准化意识,标准化流程才能被准确地执行。因此,制定标准化操作规程固然重要,但培训人员的素质更重要。为更好执行标准化操作,质量控制的监管极为重要和必要。

    四、实验记录

    1、意义

    1)   详尽的实验记录有利于总结工作并寻找实验中的差错。每一研究项目的全部实验记录均须归档保存。若一旦出现问题需要审核,完整的实验记录将会提供最可靠的资料。

    2)   完全依靠个人记忆绝非明智之举。将结果立即记录于实验记录本,而非日后耗费时间再重新回忆记录,以免遗忘某些重要的细节。

    3)   获得某些经验后,研究人员可能想了解早期所开展而当时并未受到重视的实验。若养成坚持作记录的好习惯,从以前的实验项目中获取信息和经验的机会就大得多。

    4)   实验记录是成功操作实验的关键。它应该是所做实验的完整记录。一本好的实验记录使人在很久以后还能重构当初实验的内容、过程、结果和教训。

    5)   研究生学习阶段,应养成详细进行实验记录的习惯。实验记录务求详尽、忠实,不仅本人一目了然,同行也能看得懂。实验记录的用途为:便于本人探究实验成败原因;供他人查找相关实验的重要信息;为撰写论文提供原始实验数据。

    2、记录内容

    l  日期:包括年、月、日和时间,环境条件(如温度、湿度等)

    l  实验名称

    l  实验目的

    l  实验材料:

       试剂(名称、批号、厂家、浓度、溶剂、保存条件)

       仪器(名称、型号、供货厂商)

       细胞/细菌(名称、复苏、冻存、保存处)

       动物(品系、来源、年龄、性别、数量)

       临床标本(姓名、性别、年龄、诊断及其他临床资料)

    l  试剂的配制

    l  实验方法:详细描述实验步骤

    l  实验结果:包括所收集的原始数据、可视图及实验结果的整理。

    l  出现的问题:应分析其可能的原因及解决方法,并详细记录于实验记录本上。

    l  实验小结:简短的实验结果总结和解释,将有助于指导后续的研究。其内容包括主要结论、存在问题、改进方法和实验体会等

    3、书写要求

    l  实验原始记录须记载于正式实验记录本上,实验记录本应按页码装订;须有连续页码编号,不得缺页或挖补。

    l  实验记录本首页一般作为目录页,可在实验开始后陆续填写,或在实验结束时统一填写。

    l  每次实验须按年、月、日顺序在实验记录本相关页码右上角或左上角记录实验日期和时间,也可记录实验条件如天气、温度、湿度等。  

    l  字迹工整,采用规范的专业术语、计量单位及外文符号,英文缩写第一次出现时须注明全称及中文释名。使用蓝色或黑色钢笔、碳素笔记录,不得使用铅笔或易褪色的笔(如油笔等)记录。

    l  实验记录需修改时,采用划线方式去掉原书写内容,但须保证仍可辨认,然后在修改处签字,避免随意涂抹或完全涂黑。空白处可标记“废”字或打叉。

    l  实验记录中应如实记录实际所作的实验;实验结果、表格、图表和照片均应直接记录或订在实验记录本中,成为永久记录。

    l  实验记录本应作为发表论文和实验室科技档案管理的必备文件。研究生毕业应在离校前将全部实验记录和其他科研资料上缴实验室保管和存档,不得随意处置或丢弃。

    五、实验资料保存

    1、电子版资料

    打印一份粘贴在实验记录本上或单独装订成册,同时保存电子版,并注意备份。例如,文字材料、各种结果的扫描图片、各种图表数据等。扫描图片的像素须足够大,一般保证分辨率dpi>300万;照片须标记放大倍数,如400;图片须进行必要标记,如Western blot扫描底片应标记日期、泳道、样品名称等。

    2、各种实验样品

    用记号笔直接在管壁上标记仅适用于短期保存,长期保存须将写于管壁的字用透明胶覆盖,否则易在反复温度变化过程中脱色。最好的标记方法是将标记文字打印到双面胶布上,然后粘贴在管壁上。样品标记内容应至少包括日期、样品名称、浓度。

    3、实验记录本

    应妥善保存,避免水浸、缺页,保持整洁无破损,避免丢失。实验结束后,原始实验记录本应由实验室负责人检查、签字后归档;实验人员可复制实验记录供本人使用,实验人员不得将实验记录原件带走。

    六、实验结果观察

    1、原则

    l  客观性与真实性

    l  实时性

    l  完整性

    七、实验结果分析和判断

    l  实事求是,必须排除任何操作因素引起的误差

    l  判断实验结果的正确性和可信性,具有统计学意义

    l  对所得到的结果进行分析,要搞清该结果可能说明的一切问题,捕获实验结果中的全部信息

    l  分析结果与结果之间的相互关系和内在的联系

     


    (责任编辑:admin)

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